如何改善二手沃特世液相色谱仪定量分析的条件呢？

含有5个组分或更少的样品，使谱峰之间达到基线分离（R＞1.5)一般较为容易。分离度会随色谱柱的使用时间逐步降低，也会由于分离条件的微小波动而在不同时间有所变化，因此在建立简单混合物的分离方法时，使R≥2。这样的分离度将有利于改善测试精度和方法的普适性；含10团种或10种以上组分的样品，分离一般会很困难，目标分离度往往必须降低至R＞1.0—1.5。

有些HPLC测定不必使全部被测组分达到基线分离，这种情况zui常见于所测样品中可能存在数种化合物但仅需检测其中的一种时。比如在普查水或土壤样品中的某污染物(如定性分析不同的除芳剂)时，仅需要分离出个别除莠剂，确定其特征保留时间进行峰鉴别即可。

尽管大多数HPLC设备能在更高的压力下工作，使用新色谱柱的工作压力不应超过170bar（2500psi , 17MPa），压力上限在2000psi以下。

限制该压力基于两点原因：*.随着色谱柱的使用，微粒杂质会逐步堵塞柱头，使柱压成倍升高；

第二.较低的压力（< 170bar）适于泵、进样阀、尤其是自动进样装置的稳定工作，密封垫的寿命更长，色谱柱堵塞的情况减少，系统的耐久性明显提高。因此，以小于泵的zui大允许压力的50%作为目标压力。

二手沃特世液相色谱仪的操作步骤:

1、打开电脑

2、打开主机、预热

3、进入仪器工作站，联机并设定仪器使用方法及仪器参数

4、启动泵的动力系统预处理(排气等)

5、检查是否漏夜、柱压是否正常

6、设置仪器方法，包括仪器的使用条件等

7、激活操作方法，等待仪器平衡、基线平直

8、仪器出现“Ready”后可进行样品分析

9、操作测试结束后，清理所有实验材料，做好清洁卫生

10、记录仪器使用日志，并与管理员办理交接手续

二手沃特世液相色谱仪的注意事项:

1、液相色谱的流动相应采用色谱纯溶剂，以满足仪器要求、避免损坏色谱柱;

2、严禁使用有污染的水等冲洗色谱柱，避免将互不相溶的溶剂一同进入泵内;

3、流动相需经过滤、除气后方可使用;

4、待分析的样品必须*溶解澄清、过滤，以避免堵塞、损坏色谱柱;

5、分析完成后，须注意及时清洗色谱柱和检测器的比色池。