9、基线漂移的主要因素:①柱温波动。②流动相不均匀。③流通池被污染或有气体。④检测器出口阻塞。⑤流动相配比不当或流速变化。⑥流动相污染、变质。⑦使用循环溶剂。
10、 检测器灵敏度不够的主要因素:①样品进样量不足。②波长设置不正确。③检测器池窗污染。④检测池中有气泡。⑤电压不稳。⑥流动相流速不合适。
11、色谱柱的使用和维护注意事项:①避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。②应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。③一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。④选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。⑤避免将复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。⑥经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。⑦保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置至次日或更长时间。⑧色谱柱使用过程中,如果压力升高,一种可能是滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进入柱内,使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。⑨以硅胶为基质的填料,只能在pH2~9范围内使用。每次分析检测完成后,用洗脱能力强的洗脱液冲洗,例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。
12、样品用直径为2.5cm,孔径为0.45um的滤膜针式过滤。如有明确要求需用离心过滤的,经离心过滤后取上清液即可。